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1 स्मीयर विधि एक फिल्म बनाने की एक विधि है जो समान रूप से सामग्री को कोट करती हैकांच की स्लाइड. स्मीयर सामग्री में एकल-कोशिका वाले जीव, छोटे शैवाल, रक्त, जीवाणु संवर्धन द्रव, जानवरों और पौधों के ढीले ऊतक, वृषण, परागकोष आदि शामिल हैं।
धब्बा लगाते समय ध्यान दें:
(1) कांच की स्लाइड अवश्य होनी चाहिएसाफ।
(2) कांच की स्लाइड समतल होनी चाहिए।
(3) कोटिंग एक समान होनी चाहिए। स्मीयर तरल को स्लाइड के मध्य के दाईं ओर गिराया जाता है, और स्केलपेल ब्लेड या टूथपिक के साथ समान रूप से फैलाया जाता है।
(4) लेप पतला होना चाहिए। एक अन्य स्लाइड को पुशर के रूप में उपयोग करें, और स्लाइड की सतह पर जहां स्मीयर समाधान टपकता है, धीरे से दाएं से बाएं ओर धकेलें (दो स्लाइडों के बीच का कोण 30°-45° होना चाहिए), और समान रूप से एक पतली परत लगाएं।
(5) स्थिर। निर्धारण के लिए रासायनिक स्थिरीकरण या सूखी विधि (बैक्टीरिया) का उपयोग किया जा सकता है।
(6)रंगाई करना। मेथिलीन ब्लू का उपयोग बैक्टीरिया के लिए किया जाता है, राइट्स स्टेन का उपयोग रक्त के लिए किया जाता है, और कभी-कभी आयोडीन का उपयोग किया जा सकता है। रंगाई का घोल पूरी चित्रित सतह को ढक देना चाहिए।
(7) कुल्ला करना। अब्ज़ॉर्बेंट पेपर में भिगोकर सुखा लें या टोस्ट करके सुखा लें।
(8) फिल्म को सील करें। लंबे समय तक भंडारण के लिए, स्लाइडों को कैनेडियन गोंद से सील करें।
2. टैबलेट विधि ग्लास स्लाइड और कवर स्लिप के बीच जैविक सामग्री रखकर और ऊतक कोशिकाओं को फैलाने के लिए एक निश्चित दबाव लागू करके शीट बनाने की एक विधि है।
3. माउंटिंग विधि एक ऐसी विधि है जिसमें स्लाइड नमूने बनाने के लिए जैविक सामग्रियों को पूरी तरह से सील कर दिया जाता है। इस विधि का उपयोग अस्थायी या स्थायी माउंट बनाने के लिए किया जा सकता है। स्लाइस लोड करने के लिए सामग्री में शामिल हैं: क्लैमाइडोमोनस, स्पाइरोगाइरा, अमीबा और नेमाटोड जैसे छोटे जीव; हाइड्रा, पौधों की पत्ती एपिडर्मिस; पंख, पैर, कीड़ों के मुखांग, मानव मौखिक उपकला कोशिकाएं, आदि।
स्लाइड विधि की तैयारी पर ध्यान देना चाहिए:
(1) स्लाइड को पकड़ते समय वह समतल होनी चाहिए या प्लेटफार्म पर रखी होनी चाहिए। पानी टपकते समय पानी की मात्रा उचित होनी चाहिए, ताकि वह कवर ग्लास से ढका रहे।
(2) सामग्री को एक विच्छेदन सुई या चिमटी के साथ ओवरलैप किए बिना खोला जाना चाहिए, और एक ही विमान पर चपटा होना चाहिए।
(3) कवर ग्लास रखते समय, हवा के बुलबुले दिखने से रोकने के लिए धीरे-धीरे पानी की बूंदों को एक तरफ से ढकें।
(4) दाग लगाते समय दाग के घोल की एक बूंद एक तरफ डालेंकांच को ढकें, और कवर ग्लास के नीचे के नमूने को समान रूप से रंगीन बनाने के लिए इसे दूसरी तरफ से अवशोषक कागज के साथ अवशोषित करें। रंग भरने के बाद, उसी विधि का उपयोग करें, पानी की एक बूंद डालें, दाग वाले घोल को चूसें और माइक्रोस्कोप के नीचे देखें।